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PCR检测污染的监测试验

来源: 上海抚生实业有限企业 >> 进入该企业展台 2023/01/17 15:53:24 已浏览:
导读:PCR检测污染的监测试验

  一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。

对照试验

一、阳性对照:

在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR反应是否*、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好,经各种是该产物的标本,如以重组质粒为阳性对照,其含量宜低不宜高(100个拷贝以下)。但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本,其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR试剂经自己使用稳定,检验人员心中有数时,在以后的实验中可免设阳性对照。

二、阴性对照:

每次PCR实验务必做阴性对照。它包括:

1.标本对照:

被检的标本是血清就用后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。

2.试剂对照:

在PCR试剂中不加模板DNA或RNA,进行PCR扩增,以监测试剂是否污染。

三、重复性试验

四、选择不同区域的引物进行PCR扩增。

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